Fils du duc de Frioul Pemmo et frère de Ratchis, Aistolf devint à son tour duc de Frioul en 744, lorsque son frère fut élevé au trône des Lombards, et conserva la charge jusqu’à ce que, en 749, il soit appelé à remplacer à nouveau son frère, cette fois-ci sur le trône de Pavie.
Roi guerrier contrairement à son frère, il tenta d’unifier la péninsule italienne sous la domination lombarde, autorisa en 750 les non Lombards à intégrer l’armée, s’opposa aux Byzantins, et réussit à conquérir en 751 l’exarchat de Ravenne [1].
Opposé à la Papauté, il chercha à soumettre Rome, imposant ou cherchant à imposer une taxe aux habitants, et menaça le Pape Étienne II, implorant le secours de Pépin le Bref, maire du palais puis roi des Francs, qui gagna la péninsule Italique et le défit à deux reprises en 754 et en 756.
Ravenne et son ancien exarchat fut donné au Pape par Pépin, constituant les États de l’Église.
Aistulf meurt accidentellement en décembre 756 des suites d’une chute de cheval.
Il eut pour successeur Desiderius.