Fils aîné de François de Guise, il est élevé dans la haine des protestants, sentiment qui s’accroît après l’assassinat de son père. Il combat à Jarnac et à Moncontour en 1569, il est l’un des instigateurs de la Saint-Barthélemy et devient le chef de la Ligue. Après la paix de Beaulieu en 1576, Henri de Guise se sent trahi par le roi Henri III. Par le jeu des alliances avec l’Espagne et Philippe II, il tente d’empêcher l’accession au trône de Henri de Navarre. Henri III fait semblant de capituler en nommant le duc de Guise lieutenant général du royaume, avant de le faire assassiner aux états généraux de Blois.